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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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Tuner(DE3) 感受態細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63286
  • 發布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63286
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進口
規格參數:

產品名稱:Tuner(DE3) 感受態細胞
規格 :100ul*10 100ul*50
分類:表達感受態細胞
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。
操作方法:
1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

長春質堿-d3質量規格:美國進口Catharanthine-d3  大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA檢測試劑盒RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit 96T/48T  HumanHyaluronicacid,HAELISA試劑盒人透明質酸(HA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

阿苯達唑砜質量規格:美國進口Albendazole Sulfone  EB病毒早期抗原(EBEA)抗體(IgG)試劑盒 Human EBEA IgG ELISA kit  HumanmalondialchehycheMDAELISAKit人二(MDA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

培哚普利酰基-α-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Perindopril Acyl-α-D-glucuronide  英文名稱MouseActi-vatedproteinCELISAKit小鼠活化蛋白C規格:96T/48T  大鼠內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit

培哚普利酰基-β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Perindopril Acyl-β-D-glucuronide  冰凍切片色素(MELANIN)染色試劑盒50  人阿米巴(Amebiasis)ELISA檢測試劑盒HumanAmebiasisELISAKit 96T/48T

載玻片細胞HISTONEH3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  480-18-2花旗松素說明書  Taxifolin

Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISA試劑盒人β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒規格:96T/48T  6882-68-4槐定堿品牌  Sophoridine

小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβ2 ELISA Kit  145572-44-7槐果堿規格  Sophocarpine

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA檢測試劑盒MouseThyroxineaibody,TAbELISAKit 96T/48T  152-95-4槐角苷  Sophoricoside

人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNP70)抗體試劑盒 Human ai U1 small nuclear ribonucleoprotein 70kDa(SNP70)aibody ELISA kit  84605-18-5環黃芪醇說明書  Cycloastragenol

58479-68-8桔梗皂苷D規格  Platycodin D   豬胰素樣肽2(GLP2)試劑盒 Pig glucagon like peptide 2,GLP2 ELISA kit

5843-65-2去甲烏藥堿品牌  Higenamine  豬胰素樣肽1(GLP1)試劑盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit

58316-41-9柴胡皂苷B2說明書  Saikosaponin B2   豬胰素(GC)試劑盒 Pig Glucagon,GC ELISA Kit

Tuner(DE3) 感受態細胞578-86-9甘草素規格  Liquiritigenin   豬胰淀粉酶α2(PAMY α2)試劑盒 Pig Pancreatic Amylase α2,PAMY α2 ELISA Kit

57-87-4甾醇規格  Ergosterol  豬原(PI)試劑盒 Pig Proinsulin,PI ELISA Kit

聯系方式
手機:13564080845
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